荧光显微镜常用的激发光源为：

A、普通白炽灯B、紫外灯C、高压汞灯D、氖灯E、卤素灯

正确答案:C

荧光显微镜分析中常用激发光源的种类

在荧光分析中常用汞灯作激发光源，根据汞蒸气压的不同可分为低压汞灯和高压汞灯：

荧光显微镜常用的激发光源-汞灯

超高压汞灯（50-200W），它是用石英玻璃制作，中间呈球形，内充一定数量的汞，工作时由两个电极间放电，引起水银蒸发，球内气压迅速升高，当水银完全蒸发时，可达50～70个标准大气压力，这一过程一般约需5～15min。超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。它发射很强的紫外和蓝紫光，足以激发各类荧光物质，因此，为荧光显微镜普遍采用。

推荐产品：欧司朗50W，103W，200W汞灯，适用于各大厂家高端荧光显微镜；一般200小时寿命，最长400小时

低压汞灯：汞蒸气，可发射出很强波长的射线，寿命很长，可长时间连续工作，射线对眼睛有害，不眼睛时不可长时间注视。

高压汞灯：又叫高强度紫外线灯，汞蒸气为1-数个大气压，可见炮区的谱线增强，在紫外光区，波长为365nm的光线更强。

中压汞灯：可以发射一系列汞线组成的不连续光谱，除254nm波长以外，多数谱线都可作为校正波长使用。此外，还有超高压汞灯、汞-氙灯、汞-锌灯等。

荧光显微镜常用的激发光源-氢洒和氘灯

前者是灯泡中加氢蒸气，经闭合放电产生160-350nm波长的光，氢朋激发态返回的基态时，就发射了氢的连续光谱，在160nm以下为线乐谱，氢灯和氘灯性能相同，其寿命也比氢灯长，因玻璃吸收紫外线，故灯壳要用石英制作，或在灯泡出光处开一石英窗，此光源适用于紫外光区的测定。

荧光显微镜常用的激发光源-氙灯

光的辐射能强度很高，它可在220-1100nm之间发射很强的连续光谱，可用于紫外区，可见光及近红外区的测定，虽其辐射范围广，使用中在生产高热的同晨有臭氧味，其寿命短，灯泡内压较大，如日立牌650-60型荧光分光光度计，氙灯平时约有7个大气压，点燃后可达30个大气压，故使用进应注意。

1、按装紧固螺丝时用力应均匀，勿成扭力，以免灯泡破裂爆炸。

2、勿用手触及灯泡，以防受热不均破裂。

3、如灯泡有油污，应用鸡皮藮酒精轻擦，不能用布、棉花等物擦拭。

氙灯和汞灯做为白光源，都能提供从紫外到近红外一系列波长的光，但它们却有着不同的激发光谱。汞灯集中在近紫外、蓝光以及绿光附近，这种在峰值的高激发能量确保产生明亮的荧光信号，但光毒性却很强。因此，HBO用来对固定样品或弱荧光成像。相比而言，氙灯光源的激发比较平缓，可以用于不同波长间强度的比较，例如用于钙离子浓度测量等。氙灯的强激发在近红外800-1000nm。

XBO较HBO的特点：

1）光谱强度更均匀

2）在红外及中红外仍有较强光谱强度

3）能量较强更易到达物镜后孔径

推荐产品：XBO75W，100W氙灯；寿命一般400小时，1200小时

荧光显微镜常用的激发光源-金属卤素灯

这是近年来出现的一种光源，它和汞灯的激发光谱很像，但它和显微镜以光纤相连，能散热，寿命更长。光纤从光源连到显微镜上，可以大量减少光产生的热能。金属卤素灯对活细胞成像的另一个优势是内置强度设计装置，可以容易调节激发光。

推荐产品：EXPO公司X-cite光源，120W，适用于各大厂家高端荧光显微镜；寿命2500小时以上。

荧光显微镜常用的激发光源-LED

近来，还出现了一种新的荧光光源：LED，这种光源的开关在毫秒间，减少样品在光照下的暴露时间，延长寿命。另外，LED光的衰减即快又精确，长期活细胞试验下可大大减少光毒性。和白光相比，LED仅仅在一个较窄的光谱激发，多个LED波段使得LED光源能为多色荧光提供应用。

推荐产品：蔡司Colibri，寿命普遍在几千个小时。

荧光显微镜的使用注意事项是哪些？

荧光显微镜是由生物显微镜和落射荧光装置组成,广泛应用于生物学、材料科学等领域。常规的配置B、G、BV、V、U五个波段可转换，还可同时进行常规透射观察。和常规的显微镜一样，操作时，需轻拿轻放。在调整光源时应戴上防护眼镜。荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节省时间，保护光源。灯熄灭后欲再用时，须待灯泡充分冷却后才能点燃。中应避免数次点燃光源。

如何更换显微镜的灯泡？

更换显微镜的灯泡，步骤如下：

1.把显微镜仰倒。然后，拉出镜架下面的灯室旋钮，打开灯室盖。

2.隔着包装袋握住灯泡，不要在灯泡上留下指纹。将触脚完全插入灯座。正确安装后，拉掉聚乙烯包装袋。

3.将灯室旋钮保持拉出状态，盖上灯室盖。然后推进灯室旋钮，锁住灯室盖。

需要注意的是：始终使用指定灯泡。使用其他灯泡有可能导致着火，不要用手触摸灯泡，如果偶然不小心在灯泡上留下指印，用一块无毛软布蘸一些酒精擦净。使用被污染的灯泡会缩短灯泡使用寿命。

LED荧光显微镜光源介绍

在LED前，荧光显微镜常用光源为高压汞灯，在LED激发光源普遍后，就成为荧光显微镜的主要光源。LED发射的单色光位于相对较窄的光谱带中，半高宽约为10nm-40nm，相对于高压汞灯，LED激发光源有几个重要优势：1）额定使用寿命可达3000小时以上，远远超过其他光源；2）整个额定使用寿命期间，其输出强度保持相对稳定，确保激发；3）LED启动和关闭时间短，即开即用，不需要预热；4）LED光效高，且亮度连续可调；5）体积小、轻便，且为冷光源，弥补汞灯的大功率、发热、使用复杂灯问题，大大的降低了荧光显微镜使用成本并提高荧光显微镜操作的简便性。

对于荧光显微镜来说，尤其是单色激发的荧光显微镜，LED具有非常大的吸引力，例如B波段激发的荧光探针FLTC/GFP标记的样板，在蓝光LED激发下了可以获得非常好的图像，而广泛应用于免疫荧光检测领域。多波段LED光源可选，并可控制每一个LED的亮度，可以实现多波长的选择激发，便捷。荧光色：365nm紫光；395nm纯蓝；455nm蓝绿色；505nm绿色:；530nm纯绿色；590nm黄色；630nm红色，更多关于多波段LED显微镜荧光激发光源SL169，